簡析OECD《噴（pēn）灑或外源施用雙（shuāng）鏈RNAi八戒影院的環境風險評估要點》

經濟合作與發（fā）展組織（OECD）《噴（pēn）灑或外源施用雙鏈RNAi八戒影院的環境風險評估要點》（八戒影院係列第104號報告）是全球首個係統（tǒng）分析dsRNA類八戒影院風險的技術文件，盡管暫不作為指導性（xìng）文件，但其（qí）提出的風險關注要點和監管建議為dsRNA類八戒影院的安全評估提供了重要技術參考。本文聚焦該報告的核心結論，重（chóng）點闡述dsRNA八戒影院與傳統（tǒng）八戒影院在環境風險評估中的關鍵差異，以期為國內dsRNA農（nóng）藥的研發和監（jiān）管（guǎn）提（tí）供借鑒。

1 報告概要

報告（gào）共有十（shí）一章，圍繞RNAi八戒影院的核心風（fēng）險問題（tí）展開，主要涵蓋核酸（suān）幹擾（RNAi）作用機製與應（yīng）用，以及風險評估特別關注點等內容（róng）。

基於現（xiàn）有科學信息，報告推論外源噴灑或施用dsRNA類終端產品可能存在與（yǔ）傳統（tǒng）化學八戒影院（yào）相似（sì）的施（shī）藥方式和施用場景，風險評估（gū）中需要考慮的因素與傳統化學八戒影院和生（shēng）物八戒影院類似，但需特別關注：非靶標（biāo）生物影響（如基因沉默脫靶效應（yīng））、環境歸趨（如dsRNA在土壤/水體中的持久性、分布）對非靶標生物的影（yǐng）響（xiǎng）。

針對dsRNA類八戒影院製劑，因製劑（jì）配方直接影響其穩定性、遞送效率及環境行為，需額外評估輔料（liào）（如穩（wěn）定劑、遞送（sòng）材（cái）料）對生物有（yǒu）效（xiào）性的影響、劑型相關的暴露風險（施藥人員/非施藥人員）及（jí）環境歸趨差異。

2 對非靶標生物的影響

外源噴灑的dsRNA八戒影院可（kě）能因序列同源性對非靶標生物（wù）（如傳粉昆蟲、水生生物等）引發脫靶效應（yīng）。報告基於醫學研究數據及不（bú）同物種（zhǒng）RNAi機製差異（yì），從序列相似性、暴露可能（néng）性（xìng）和生物響應性三個維度，分析了其對（duì）微生物、動植（zhí）物等非靶標生物的（de）潛在（zài）風險。

2.1 基因序（xù）列相似可能引發的（de）潛在風險（xiǎn）觸發脫靶基因沉默的風險主要取決於dsRNA與非靶標生物基因序列的相似性。小RNA可通過與非靶標信使RNA（mRNA）的部分互補引發脫靶基因沉默。長度為21 nt（核苷酸）的核酸鏈，在特異性與脫靶風險間達到最佳平衡，更短或更長的都可能增加脫靶風險。哺乳動物，種子區（第2-8位核苷酸）的匹配可能（néng）足以引發（fā）抑製（zhì）。非靶標昆蟲，如基因序列≥19 nt連續匹配，可能對非靶（bǎ）標昆蟲（如蜜蜂）產生基因沉默效（xiào）應。

報告特（tè）別提醒，不能完（wán）全通過計算機模（mó）擬比較靶標生物序列（liè）的相似性，序（xù）列相似性並不等同於實（shí）際效應，需結合實驗驗證（zhèng）。

2.2 RNAi機製（zhì）差異引發的潛在風（fēng）險除基因序列相似性外，暴露濃（nóng）度、持續時間及物（wù）種間RNAi通路差異（yì）也會影響基因（yīn）沉默效應，其效應（yīng）呈現劑量依賴性，並存在上下閾值。現有研究表（biǎo）明，極端敏感物種數量有限。

微生物，雖然RNAi效應主要存在於真核生（shēng）物中，但（dàn）該屬不同物種對環境RNA的響（xiǎng）應存在廣泛差異。土壤微生物可（kě）能通過影響植（zhí）物攝取間接引發RNAi效應。

昆蟲，對RNAi效應存在顯著差異，不僅存在目間、種間及種（zhǒng）群差異，且發育早期比晚期更敏感。其中鞘翅目敏感性顯著高於其他目。

植物，因植物角質層構成的天然屏障（zhàng），需經修飾等（děng）輔助措施才（cái）能產生係統性效應。

哺（bǔ）乳動（dòng）物，膳食攝入的微小RNA會被消化係統降解，在特殊條件下（如不同dsRNA濃度、修飾、配方及應用場景）是否可能發生效應仍存爭（zhēng）議。目前美國環保署和該（gāi）報告專家組均認可“無論RNA類型或（huò）進入消化係統時的結構狀（zhuàng）態如何，人類（lèi）攝入的植物材料中表達的（de）內源或外源的RNA都很可能被降解（jiě）”的結論。

魚類、爬（pá）行類與鳥類，其攝取屏障機製尚不明確。根據現有科學文獻，美國環（huán）保署認為膳（shàn）食dsRNA攝取屏障在所有脊椎動物中均存在。

基於以上（shàng）研究，報告建議在（zài）評價dsRNA的葉麵（miàn）施用作物保護產品對非靶標生物的風險時，需充分考慮即（jí）使近緣屬種對環境RNA的響應也可能存在顯著差異的問題。

2.3 其他（tā）潛在風險針對哺乳動物和其他非靶標生物可能存在的跨界基因調控、免疫反（fǎn）應、機製飽和效應和致敏性風險，報告雖給出結論，但提醒因研究（jiū）結果（guǒ）相對不充分，使用時需保（bǎo）持謹慎。

一是（shì）針對哺（bǔ）乳動（dòng）物跨界基因調控，研（yán）究表（biǎo）明，小鼠、靈長類（lèi）及人類均未出現具有生物學意義的植物微小RNA攝取現象。

二是針對可（kě）能（néng）引發的免疫反應，報告指出理論上環境dsRNA可能刺（cì）激哺乳動物和（hé）其他非靶標（biāo）生物的先天免疫反應，但目前缺乏證據。內源dsRNA，澳大利亞、加拿大和美國監管機構給出（chū）了不（bú）太可能引起非靶標哺乳動（dòng）物（wù）的免疫反應的結論。

三是（shì）針對可能存在的機製飽和效應，現有數據支持dsRNA八戒影院施用後，環境中RNAi機製飽和對非靶標生物構成風險的可能性極（jí）低。

四是針對可能引發的致敏性，由（yóu）於RNAi不表達新蛋白（bái），該技術不應存在致（zhì）敏性問題。

3 環境歸趨及（jí）潛（qián）在風險

為界定此問題，報告分析了施用後dsRNA的穩定性與持久（jiǔ）性，以（yǐ）及從目標（biāo）植物或施藥位點（diǎn）的遷移（yí）情（qíng）況。

3.1 環境中的穩定性和降解數據（jù）表明，dsRNA在環境中降解快，持續存在風險（xiǎn）較低。施用後，降解過程與傳統化（huà）學八戒影院及生物八戒影院相似，但需要特（tè）別關（guān）注（zhù）經（jīng）穩定性修飾後的製劑產品在環（huán）境（土壤、水體、生物基（jī）質）中（zhōng）的降解速率（lǜ），以及關注局（jú）部遷移途徑（如花粉）的潛在影響。

一是土壤（rǎng）降（jiàng）解。dsRNA在土壤中受溫度（dù）、pH、微（wēi）生物及核酸酶影（yǐng）響，通（tōng）常＜2天降解，與有機質結合可能延緩降解且降低（dī）生物有效（xiào）性，累積風險較低（dī）。

二（èr）是植（zhí）物表麵降解。葉麵dsRNA易被角質層和微（wēi）生物分解，紫外線加速降解，降雨影響較小。

三是水體降解。因土壤中快速降解，減（jiǎn）少了徑流遷移。在水中（zhōng）微生（shēng）物（wù）主導降解，DT50＜3天，7天內完全降（jiàng）解（jiě），沉積物中DT50＜6天，難以（yǐ）持續存在。

3.2 葉麵吸收、遷移（yí）和擴增的可能性葉麵吸收，外源（yuán）dsRNA分子可通過葉麵吸收（shōu）進入植物細胞（bāo），但具體機製尚不明確。現有證據表明，未經（jīng）修飾的dsRNA難以係統性轉運，有效（xiào）吸收需依（yī）賴特殊製劑或（huò）遞送方法。

遷（qiān）移擴散，遷（qiān）移可能通過徑流、滲透、噴霧漂移、花（huā）粉（需（xū）關注蜂巢累積風（fēng）險）、昆蟲攜帶及（jí）根係吸收等遷移，但前三者為主要途徑（jìng），花粉貢獻率雖低但需警惕脫靶效應。

植物體內擴增，dsRNA的擴增需依賴與（yǔ）植物（wù）mRNA的序列同源性，因此靶向害蟲基因的dsRNA極難觸發植物體內的擴增機製。

4 生（shēng）態毒理學風險評估建議

報告指出，現有化學農（nóng）藥測試標準和分級評估框架經調整後適用於dsRNA八戒影院，但需重點關注其特殊作用機製帶來的風險。核心建（jiàn）議包括：

一是暴露水平（píng）評估。相較（jiào）於傳統化學八戒影院，dsRNA八戒影院因（yīn）施用劑量（liàng）較低（dī）且環（huán）境降解迅速，預期環境暴露量有限。建議參考轉基因作物Bt蛋白持久性評估方法，建立dsRNA環（huán）境歸趨標準。

二（èr）是非靶標風（fēng）險評估原則。優先評估非靶（bǎ）標生物暴露可能性及環境RNAi響應性。不能單獨使用序列信息預測脫靶（bǎ）效（xiào）應。建議采用生物（wù）信息（xī）學指導非靶標物種測試優先（xiān）級排序。

三是脊椎動物安全性。人類長期（qī）安全食用含dsRNA的動植物源性食品（含與人（rén）類基因同源（yuán）序列）。脊椎動物存在多重吸收屏障：唾液/消化道（dào）核酸酶、胃酸環境降解（jiě）、腸上皮多糖屏障、細胞內溶酶體降解係統。哺乳動物吸收屏障機製可推廣至其他脊椎動物。

四是（shì）關注產品（pǐn）特性。需結合施用方式（溫室/露天/誘餌（ěr）/噴霧）評估風險。特殊製劑（如增強靶標吸收）需額外評估對dsRNA環境持久性的影響和非靶標生物（wù）吸收屏障的改變。

五是現行測（cè）試方案需要優化（huà）。與傳統八戒影院相比需延長觀察周期，以涵蓋（gài）dsRNA八戒影院的延（yán）遲效應，增加dsRNA降（jiàng）解動態監測指標，對RNAi敏感生物需考慮全生命周期研究（jiū）和亞致死效應評估。

六是種間差異認知。目前無法預測無脊椎動物類（lèi）群對環境dsRNA的響應差異，需開展產品特異性實證測（cè）試。

七（qī）是關於非靶（bǎ）標生物對dsRNA的吸收。製劑對吸（xī）收（shōu）特性和環境（jìng）持久性的影響研究數據，對於準（zhǔn）確表征dsRNA的暴露風險至關重要。

八是當產品製劑可能改變dsRNA吸收屏障（zhàng）時，需開（kāi）展針對該製劑的生物體或替代（dài）模型毒（dú）理學測試，以更準確評估潛在危害特性，因此可能需要產品特異性（xìng）實證測試，以便確（què）定危（wēi）害特征、量（liàng）化暴露水（shuǐ）平，為風險（xiǎn）評估提供依據。

九是dsRNA八戒影院風險評估方案（àn）需進行的調整（zhěng）。評估內容須包含dsRNA隨時（shí）間降解的監測結果。對已證實具有（yǒu）環境RNA響應性的生物，需考慮開（kāi）展生命周期研究，以及非致死效應研究。

5 展望

未來監管機（jī）構及學術界、產業界研究者需要通力合作，進一步補充和完善dsRNA類八戒影院在複雜環境中的行為資（zī）料，並建立標準化測試和評價方法，以加強這一新興八戒影院類別的科學監管。